Placeholder

Транспортная среда Амиеса

Транспортная среда Амиеса с углем

Транспортная среда Амиеса рекомендуется для пересылки и консервации различных биоматериалов, подлежащих микробиологическому исследованию.

Состав**:

Ингредиенты
грамм/литр
Натрия хлорид
3,00
Калия хлорид
0,20
Кальция хлорид
0,10
Магния хлорид
0,10
Калия дигидрофосфат
0,20
Натрия гидрофосфат
1,15
Натрия тиогликалят
1,00
Уголь (активированный)
10,00
Агар-агар
4,00
Конечное значение рН (при 25°С) 7,2 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 20,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Разлить в необходимом количестве во флаконы с завинчивающимися крышками или в пробирки, например, по 6 мл. Стерилизовать автоклавированием при 1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить в вертикальном положении. Во время застывания несколько раз повернуть пробирки (для равномерного распределения частиц угля в среде).

Принцип и оценка результата:

Amies (1) модифицировал транспортную среду Stuart (2, 3, 4) путем замены глицерофосфата на неорганический фосфатный буфер и добавления в среду активированного угля. В данном виде среда имеет низкий редокс-потенциал (за счет присутствия тиогликолята натрия и небольшого количества агар-агара). Уголь помогает нейтрализовать вещества, токсичные для некоторых возбудителей, например, гонококков. Соли кальция, магния, калия и натрия способствуют выживанию гонококков и поддерживают жизнеспособность других бактериальных клеток.

Для отбора материала рекомендуется использовать ватные тампоны или деревянные палочки, которые опускают на одну треть глубины среды. Во время завинчивания крышки тампон продвигается ко дну пробирки со средой. Крышка должна быть плотно завинчена. Среду с материалом рекомендуется держать на холоде, но не замораживать.

Для выделения и идентификации микроорганизмов образец по возможности быстро и асептично извлекают из пробирки и делают посевы на соответствующих средах.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий черный порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется полужидкая среда, соответствующая по плотности 0,4%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

В пробирках формируется черный опалесцирующий столбик геля.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (2% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35°С после подращивания на триптон-соевом агаре (М290).

Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Выделение
Escherichia coli (25922)
Обильное
Klebsiella pneumoniae (13883)
Обильное
Pseudomonas aeruginosa (9027)
Обильное
Salmonella typhi (6531)
Обильное
Shigella flexneri (12022)
Обильное
Staphylococcus aureus (25923)
Обильное
Vibrio cholerae (15748)
Обильное

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.

 

 

Транспортная среда Амиеса без угля

Эта среда используется для транспортировки и хранения материала для микробиологического исследования.

Состав**:

Ингредиенты
грамм/литр
Натрия хлорид
3,00
Калия хлорид
0,20
Кальция хлорид
0,10
Магния хлорид
0,10
Калия дигидрофосфат
0,20
Натрия гидрофосфат
1,15
Натрия тиогликолят
1,00
Агар-агар
4,00
Конечное значение рН (при 25°С) 7,3 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 10,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Разлить в пробирки или флаконы с завинчивающимися крышками по 6 мл или в другом количестве. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить в вертикальном положении.

Принцип и оценка результата:

Транспортные среды нужны и они должны не отличаться питательностью, быть полужидкими, препятствовать ферментативной деструкции микроорганизмов и их токсическому окислению.

Данная среда является модификацией ранее предложенной среды Кэри-Блера (1, 2) и используется для транспортировки и хранения материала, предназначенного для микробиологического исследования. Исходная транспортная среда (3, 4) была предназначена для материала, содержащего гонококки. Кэри и Блер (2) отметили избыточный рост на ней контаминирующих микроорганизмов из фекалий, содержащих шигеллы. Контаминирующие микроорганизмы использовали глицерофосфат для получения энергии и поэтому для придания буферных свойств лучше было использовать неорганические соли. В среде Амиеса нет метиленового синего.

Для сбора материала используют стерильные ватные тампоны на деревянных палочках. Их опускают на треть в транспортную среду и обламывают так, чтобы при завинчивании крышки тампон продвинулся ко дну пробирки. Крышку плотно закрывают. Материал будет сохраняться во время транспортировки, без существенной гибели в нем микроорганизмов по мере хранения. Если этот период будет достаточно продолжительным, на транспортной среде могут вырастать некоторые контаминирующие микроорганизмы. После транспортировки материал надо немедленно засевать на соответствующие питательные среды.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется полужидкая среда, соответствующая по плотности 0,4%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда бесцветна, прозрачна или слегка опалесцирует, если в пробирках формируется столбик геля.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (1,0% вес/об) имеет рН 7,3 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 при 35-37°С

Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Выделение *
Neisseria meningitidis (13090)
Очень хорошее
Staphylococcus aureus (25923)
Очень хорошее
Staphylococcus epidermidis (12228)
Очень хорошее
Streptococcus pyogenes (19615)
Очень хорошее

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.